LEC-1 倉鼠卵巢細胞

LEC-1 倉(cang) 鼠卵巢細胞介紹

Lec1 (原先叫做Pro-5wgaR1 3C,ATCC)是從(cong) 脯氨酸缺陷型的CHO克隆 Pro-5中挑選出來的能抗麥芽凝集素的突變株。Lec1 缺乏稱作GlcNAc-T1的糖基轉移酶，從(cong) 而N-連接碳水化合物被阻斷在Man5GlcNAc2Asn中間體(ti) 。對於(yu) 研究N-連接糖基化改變對內(nei) 源糖蛋白或病毒感染、以克隆DNA轉染產(chan) 生的糖蛋白的功能和區隔化的影響，這些細胞十分有用。
細胞特性

1） 來源：倉(cang) 鼠卵巢

2） 形態：上皮細胞樣，鬆散貼壁

3） 含量：>1x106 個(ge) /mL

4） 汙染：支原體(ti) 、細菌、酵母和真菌檢測為(wei) 陰性

5） 規格：T25瓶或者1mL凍存管包裝

運輸和保存

可選擇幹冰運輸及發送複蘇存活細胞方式

（1）幹冰運輸，收到後立即轉入液氮或者-80度冰箱凍存或直接複蘇；

（2）存活細胞，收到後應繼續生長，傳(chuan) 代達到細胞生長狀態良好時，再進行凍存。具體(ti) 操作見細胞培養(yang) 步驟。

（3）收到細胞後請拍照，3天內(nei) 如果發現汙染，請及時拍照與(yu) 我們(men) 聯係。

細胞用途：僅(jin) 供科研使用。     

細胞接收後的處理：

1） 收到細胞後，請檢查發貨培養(yang) 瓶的狀況，若發現培養(yang) 瓶破損、有液溢出及細胞有汙染，請拍照後及時聯係我們(men) 。

2） 在顯微鏡下確認細胞生長狀態時，在低倍鏡（4或5X物鏡)下進行，能準確判斷細胞的傳(chuan) 代密度。看細胞的形態請在10X和20×物鏡下，同時給剛收到的細胞拍照，（10×，20×）各2-3張以及培養(yang) 瓶外觀照片一張留存，作為(wei) 細胞需要售後時提供收到細胞時細胞狀態的依據。

3） 觀察好細胞狀態後，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置於(yu) 37℃培養(yang) 箱放置約2-3h。

4） 貼壁細胞：在運輸過程中貼壁細胞會(hui) 有脫落的現象，如發現貼壁細胞有脫落或者脫落後抱團生長，可將T25瓶置於(yu) 37℃培養(yang) 箱放置約2-3h，然後抽出瓶中的培養(yang) 基和未貼壁細胞1000rpm離心5分鍾，棄去上清重懸後接種到加有按照說明書(shu) 細胞培養(yang) 條件新配製的*培養(yang) 基的原培養(yang) 瓶中（或新的培養(yang) 瓶中）。

5） 懸浮細胞：T25瓶置於(yu) 37℃培養(yang) 箱放置約2-3h，然後抽出瓶中的培養(yang) 基和細胞1000rpm離心5分鍾，棄去上清重懸後接種到新的培養(yang) 瓶中（加入按照說明書(shu) 細胞培養(yang) 條件新配製的*培養(yang) 基）。

6）備注：運輸用的培養(yang) 基（灌液培養(yang) 基）不能再用來培養(yang) 細胞，請換用按照說明書(shu) 細胞培養(yang) 條件新配製的*培養(yang) 基來培養(yang) 細胞。  收到細胞後di一次傳(chuan) 代建議1：2傳(chuan) 代 。

LEC-1 倉(cang) 鼠卵巢細胞培養(yang) 步驟

一．培養(yang) 基及培養(yang) 凍存條件準備：

1） 準備MEM α（推薦iCell-0003）培養(yang) 基; 優(you) 質胎牛血清，10%；雙抗，1%。細胞培養(yang) 過程中，貼壁不牢，鬆散貼壁，容易脫落。

2） 培養(yang) 條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yang) 箱濕度為(wei) 70%-80%。

3） 凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配。

二． 細胞處理：

1） 複蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，離心管加入4mL培養(yang) 基混合均勻。在800-1000RPM條件下離心4-5分鍾，棄去上清液，補加1-2mL培養(yang) 基後吹勻。然後將所有細胞懸液加入T25培養(yang) 瓶中培養(yang) ，補加培養(yang) 基至6ml。

2） 細胞傳(chuan) 代：如果細胞密度達80%，即可進行傳(chuan) 代培養(yang) 。

注：di一次傳(chuan) 代推薦傳(chuan) 代比例為(wei) 1:2，以後傳(chuan) 代比例可根據客戶需要自己決(jue) 定。

3）細胞凍存：待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。

下麵T25瓶為(wei) 類；

1，細胞凍存時，取上清，可使用血球計數板計數。

2，4min ，1000rpm 離心去掉上清。加1ml血清重懸細胞，根據細胞數量加入血清和DMSO，輕輕混勻，DMSO終濃度為(wei) 10%，細胞密度1-2xE6/ml，每支凍存管凍存1ml細胞懸液，注意凍存管做好標識。

3，將凍存管置於(yu) 程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個(ge) 小時以後轉入液氮灌儲(chu) 存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

18新利苹果客户端密码主要產(chan) 品和技術服務：

一、原代細胞服務
       各類模式哺乳動物的多種原代細胞資源；
       多種人源性正常及腫瘤原代細胞資源；
       原代細胞分離和培養(yang) 相關(guan) 試劑、kit、培養(yang) 基添加劑等；
       原代細胞相關(guan) 技術服務和整體(ti) 實驗外包服務；

二、細胞株/係服務
       細胞株/係培養(yang) 、增殖、凍存和相關(guan) 說明書(shu) ；
       細胞係培養(yang) 過程的技術指導；
       細胞係培養(yang) 基、添加劑、血清及相關(guan) 生長因子、試劑等；

三、iPS細胞
       iPS細胞基礎培養(yang) （有滋養(yang) 層or無滋養(yang) 層在）；
       iPS細胞增殖及冷凍保存；
       iPS基礎培養(yang) 技術實習(xi) ；
       新藥及實驗儀(yi) 器上市前評估；

四、技術外包服務：各類細胞生物學實驗、分子生物學實驗、顯微鏡拍照服務等

五、其他：根據客戶需要定製服務等

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• NCI-H1417細胞NCI-H1417 人小細胞肺癌細胞 STR鑒定
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