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18新利苹果客户端下载產(chan) 品介紹
RH-35 大鼠肝癌細胞/鏡像綺點(iCell)介紹
RH-35細胞株源自由N-2feuorenyldiuctamid在雄性AxC大鼠中誘導的可移植Reulier H-35肝癌。細胞較小,饑餓24小時可以使其同步。
細胞特性
來源:大鼠,肝癌
形態:上皮細胞樣,貼壁生長
含量:>1x106 個(ge) /mL
汙染:支原體(ti) 、細菌、酵母和真菌檢測為(wei) 陰性
規格:T25瓶或者1mL凍存管包裝
運輸和保存:使用含有優(you) 質胎牛血清的2ml凍存管發送存活細胞。收到細胞後,可在1000RPM,常溫條件下,離心5min後,於(yu) 潔淨操作台棄去上清,加入推薦使用的培養(yang) 基後轉移至10cm培養(yang) 皿或者T25培養(yang) 瓶中培養(yang) ,傳(chuan) 代達到細胞生長狀態良好時,再進行凍存。具體(ti) 操作見細胞培養(yang) 步驟。
細胞用途:僅(jin) 供科研使用。
細胞培養(yang) 步驟
一.培養(yang) 基及培養(yang) 凍存條件準備:
準備DMEM-H培養(yang) 基(DMEM-H,GIBCO,貨號12800017,添加NaHCO3 1.5g/L),90%;胎牛血清,10%。(DMEM液體(ti) 培養(yang) 基:GIBCO,11995-065)。
培養(yang) 條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yang) 箱濕度為(wei) 70%-80%。
凍存液:90%*培養(yang) 基,10%DMSO,現用現配。液氮儲(chu) 存。
RH-35 大鼠肝癌細胞/鏡像綺點(iCell)處理:
複蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yang) 基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鍾,棄去上清液,補加1-2mL培養(yang) 基後吹勻。然後將所有細胞懸液加入培養(yang) 瓶中培養(yang) 過夜(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yang) 基,培養(yang) 過夜)。第二天換液並檢查細胞密度。
細胞傳(chuan) 代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳(chuan) 代培養(yang) 。
1. 棄去培養(yang) 上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)於(yu) 培養(yang) 瓶中,置於(yu) 37℃培養(yang) 箱中消化1-2分鍾,然後在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓並脫落,迅速拿回操作台,輕敲幾下培養(yang) 瓶後加少量培養(yang) 基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養(yang) 基,輕輕打勻後吸出,在1000RPM條件下離心4分鍾,棄去上清液,補加1-2mL培養(yang) 液後吹勻。
4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yang) 基的新皿中或者瓶中。
3)細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養(yang) 基後加入少量胰酶,細胞變圓脫落後,加入約1ml含血清的培養(yang) 基後加入凍存管中,再添加10%DMSO後進行凍存。
18新利苹果客户端密码主要產(chan) 品和服務介紹:
一、原代細胞服務:
各類模式哺乳動物的多種原代細胞資源
多種人源性正常及腫瘤原代細胞資源
原代細胞分離和培養(yang) 相關(guan) 試劑、kit、培養(yang) 基添加劑等
原代細胞相關(guan) 技術服務及整體(ti) 實驗外包服務
二、細胞係服務:
細胞株/係培養(yang) 、增殖、凍存和相關(guan) 說明書(shu)
細胞係培養(yang) 過程的技術指導
細胞係培養(yang) 基、添加劑、血清及相關(guan) 生長因子、試劑等
三、iPS細胞服務:
iPS細胞基礎培養(yang) (有滋養(yang) 層or無滋養(yang) 層)
iPS細胞增殖及冷凍保存
iPS基礎培養(yang) 技術實習(xi)
新藥及實驗儀(yi) 器上市前評估
四、其他技術外包服務、客戶定製服務等
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相關(guan) 產(chan) 品
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