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您的位置：首頁 > 18新利苹果客户端下载 > 細胞分類 > 細胞係 > EL4EL4 小鼠淋巴瘤細胞/鏡像綺點（iCell）
18新利苹果客户端下载產(chan) 品介紹
EL4是從(cong) 用9,10-二甲基-1,2-苯並蒽在C57BL小鼠中誘導的淋巴瘤中建立的。能抗0.1 mM qing化可的鬆，對20 mcg/ml PHA敏感。 還有一個(ge) 亞(ya) 株(EL4.IL-2, ATCC TIB-181)可以生成高水平的IL-2。檢測表明肢骨發育畸形病毒(鼠痘)陰性。
細胞特性
1） 來源：T 淋巴細胞；淋巴瘤
2） 形態：淋巴母細胞
3） 含量：>1x106 個(ge)
4） 汙染：支原體(ti) 、細菌、酵母和真菌檢測為(wei) 陰性
5） 規格：T25瓶或者1mL凍存管包裝
運輸和保存
可選擇幹冰運輸及發送複蘇存活細胞方式：
（1）幹冰運輸，收到後立即轉入液氮凍存或直接複蘇；
（2）存活細胞，收到後應繼續生長，傳(chuan) 代達到細胞生長狀態良好時，再進行凍存。具體(ti) 操作見細胞培養(yang) 步驟。
（3）收到細胞後請拍照，3天內(nei) 如果發現汙染，請及時拍照與(yu) 我們(men) 聯係。
細胞用途：僅(jin) 供科研使用。
EL4 小鼠淋巴瘤細胞/鏡像綺點（iCell）接收後的處理：
1） 收到細胞後，請檢查是否漏液，如果漏液，請拍照片發給我們(men) 。
2） 請先在顯微鏡下確認細胞生長狀態，酒精消毒瓶壁並將T25瓶置於(yu) 37℃培養(yang) 約2-3h。
3） 棄去T25瓶中的培養(yang) 基，添加6ml新的*培養(yang) 基。
4） 如果細胞長滿90%請及時進行細胞傳(chuan) 代。
細胞培養(yang) 步驟
一．培養(yang) 基及培養(yang) 凍存條件準備：
1） 準備DMEM培養(yang) 基；馬血清，10%；雙抗，1%。
2） 培養(yang) 條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yang) 箱濕度為(wei) 70%-80%。
3） 凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配。
二． 細胞處理：
1） 複蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yang) 基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鍾，棄去上清液，補加1-2mL培養(yang) 基後吹勻。然後將所有細胞懸液加入培養(yang) 瓶中培養(yang) 過夜（或將細胞懸液加入250px皿中，加入約8ml培養(yang) 基，培養(yang) 過夜）。第二天換液並檢查細胞密度。
2） 細胞傳(chuan) 代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳(chuan) 代培養(yang) 。
對於(yu) 貼壁細胞，傳(chuan) 代可參考以下方法：
1. 棄去培養(yang) 上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於(yu) 培養(yang) 瓶中，置於(yu) 37℃培養(yang) 箱中消化1-2分鍾，然後在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓並脫落，迅速拿回操作台，輕敲幾下培養(yang) 瓶後加少量培養(yang) 基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養(yang) 基，輕輕打勻後吸出，在1000RPM條件下離心4分鍾，棄去上清液，補加1-2mL培養(yang) 液後吹勻。
4. 收到細胞後*傳(chuan) 代推薦將細胞懸液按1：2的比例分到新的含6ml培養(yang) 基的新皿中或者瓶中，建議凍存一支備用，後續傳(chuan) 代根據實際情況按1:2到1:5的比例進行。
對於(yu) 懸浮細胞，傳(chuan) 代可參考以下方法：
1)收集細胞，1000RPM條件下離心4分鍾，棄去上清液，補加1-2mL培養(yang) 液後吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yang) 基的新皿中或者瓶中。
2)可選擇半數換液方式，棄去半數培養(yang) 基後，將剩餘(yu) 細胞懸起，將細胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yang) 基的新皿中或者瓶中。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。
下麵T25瓶為(wei) 類；
1，細胞凍存時，棄去培養(yang) 基後，PBS清洗一遍後加入1ml胰酶，細胞變圓脫落後，加入1ml*培養(yang) 基終止消化，可使用血球計數板計數。
2，4min 1000rpm 離心去掉上清。加1ml血清重懸細胞，根據細胞數量加入血清和DMSO，輕輕混勻，DMSO終濃度為(wei) 10%，細胞密度1-2xE6/ml，每支凍存管凍存1ml細胞懸液，注意凍存管做好標識。
3，將凍存管置於(yu) 程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個(ge) 小時以後轉入液氮灌儲(chu) 存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
18新利苹果客户端密码主要產(chan) 品和服務介紹：
一、原代細胞服務：
各類模式哺乳動物的多種原代細胞資源
多種人源性正常及腫瘤原代細胞資源
原代細胞分離和培養(yang) 相關(guan) 試劑、kit、培養(yang) 基添加劑等
原代細胞相關(guan) 技術服務及整體(ti) 實驗外包服務
二、細胞係服務：
細胞株/係培養(yang) 、增殖、凍存和相關(guan) 說明書(shu)
細胞係培養(yang) 過程的技術指導
細胞係培養(yang) 基、添加劑、血清及相關(guan) 生長因子、試劑等
三、iPS細胞服務：
iPS細胞基礎培養(yang) （有滋養(yang) 層or無滋養(yang) 層）
iPS細胞增殖及冷凍保存
iPS基礎培養(yang) 技術實習(xi)
新藥及實驗儀(yi) 器上市前評估
四、其他技術外包服務、客戶定製服務等
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