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18新利苹果客户端下载產(chan) 品介紹
NCTC1469 小鼠正常肝細胞/鏡像綺點(iCell)介紹
1952年建係,源於(yu) 正常C3H/An小鼠的肝髒組織,表達H-2K抗原,鼠痘病毒陰性。
細胞特性
1)來源:小鼠的肝組織
2)形態:上皮細胞樣
3)含量:>1x106 個(ge) /mL
4)汙染:支原體(ti) 、細菌、酵母和真菌檢測為(wei) 陰性
5)規格:T25瓶或者1mL凍存管包裝
細胞接受後的處理:
1)收到細胞後,請檢查是否漏液,如果漏液,請拍照片發給我們(men) 。
2)請先在顯微鏡下確認細胞生長狀態,去掉封口膜並將T25瓶置於(yu) 37℃培養(yang) 約2-3h。
3)棄去T25瓶中的培養(yang) 基,添加6ml本公司附帶的*培養(yang) 基。
4)如果細胞長滿(90%以上)請及時進行細胞傳(chuan) 代,傳(chuan) 代培養(yang) 用6ml本公司附帶的*培養(yang) 基。
5)接到細胞次日,請檢查細胞是否汙染,若發現汙染或疑似汙染,請及時與(yu) 我們(men) 取得聯係。
細胞用途:僅(jin) 供科研使用。
NCTC1469 小鼠正常肝細胞/鏡像綺點(iCell)培養(yang) 操作規程,供參考
一.培養(yang) 基及培養(yang) 凍存條件準備:
1)準備DMEM培養(yang) 基(DMEM,GIBCO,貨號11995-065);馬血清,10%;雙抗1%。
2)培養(yang) 條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yang) 箱濕度為(wei) 70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配。液氮儲(chu) 存。
二.細胞處理:
1)複蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水麵要低於(yu) 凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yang) 基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鍾,棄去上清液,加入1mL培養(yang) 基後吹勻。然後將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yang) 基的培養(yang) 瓶中培養(yang) 過夜。第二天換液並檢查細胞密度。
2)細胞傳(chuan) 代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳(chuan) 代培養(yang) 。
對於(yu) 貼壁細胞,傳(chuan) 代可參考以下方法:
1.棄去培養(yang) 上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)於(yu) 培養(yang) 瓶中,置於(yu) 37℃培養(yang) 箱中消化1-2分鍾,然後在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓並脫落,迅速拿回操作台,輕敲幾下培養(yang) 瓶後加入3ml此細胞的培養(yang) 基終止消化。
3.輕輕吹打後吸出,移入15ml離心管中,在1000RPM條件下離心4分鍾,棄去上清液,加入1mL培養(yang) 液後吹勻。
4.移入到事先準備好的含有5ml培養(yang) 基的T-25培養(yang) 瓶中或含有14ml培養(yang) 基的T-75培養(yang) 瓶中培養(yang) 。
3)細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。
下麵T25瓶為(wei) 例;
1.細胞凍存時,棄去培養(yang) 基後,PBS清洗瓶底1-2次後加入1ml胰酶,細胞變圓脫落後,加入2ml*培養(yang) 基終止消化,可使用血球計數板計數。
2.1000RPM離心5分鍾去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至終濃度為(wei) 10%。加入DMSO後迅速混勻,按每1ml的數量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個(ge) 凍存管細胞數目大於(yu) 1X106個(ge) 細胞凍存。
3.將凍存管置於(yu) 程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個(ge) 小時以後轉入液氮灌儲(chu) 存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
18新利苹果客户端密码主要產(chan) 品和服務介紹:
一、原代細胞服務:
各類模式哺乳動物的多種原代細胞資源
多種人源性正常及腫瘤原代細胞資源
原代細胞分離和培養(yang) 相關(guan) 試劑、kit、培養(yang) 基添加劑等
原代細胞相關(guan) 技術服務及整體(ti) 實驗外包服務
二、細胞係服務:
細胞株/係培養(yang) 、增殖、凍存和相關(guan) 說明書(shu)
細胞係培養(yang) 過程的技術指導
細胞係培養(yang) 基、添加劑、血清及相關(guan) 生長因子、試劑等
三、iPS細胞服務:
iPS細胞基礎培養(yang) (有滋養(yang) 層or無滋養(yang) 層)
iPS細胞增殖及冷凍保存
iPS基礎培養(yang) 技術實習(xi)
新藥及實驗儀(yi) 器上市前評估
四、其他技術外包服務、客戶定製服務等
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相關(guan) 產(chan) 品
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