Bv2小鼠小膠質細胞/STR鑒定

Bv2小鼠小膠質細胞/STR鑒定

細胞介紹

該細胞來源於(yu) 德國DSMZ（German collection of microorganisms and cell cultures），源於(yu) C57BL/6小鼠小膠質細胞，表達核v-myc、染色體(ti) v-raf癌基因，表麵表達envgp70抗原，在形態學、表型及功能上有吞噬細胞的特征。

細胞特性

1） 來源：小鼠腦

2） 形態：上皮細胞樣 鬆散貼壁，懸浮和貼壁細胞混合生長

3） 含量：>1x10^6  細胞數

4） 規格：T25瓶或者1mL凍存管包裝

5)  用途：僅(jin) 供科研使用。

運輸和保存

幹冰運輸及複蘇好存活細胞

（1）1mL凍存管包裝幹冰運輸，收到後-80度冰箱保存過夜後轉入液氮或直接複蘇，若發現幹冰已揮發幹淨、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有汙染，請立即與(yu) 我們(men) 聯係。

（2）T25瓶複蘇的存活細胞常溫發貨，收到後按照細胞接收後的處理方法操作。

細胞接收後的處理

1）收到細胞後，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置於(yu) 37℃培養(yang) 箱放置約2-3h，若發現培養(yang) 瓶破損、有液溢出及細胞有汙染，請拍照後及時聯係我們(men) 。

2）請在4或5X顯微鏡下確認細胞狀態，同時給剛收到的細胞拍照（10×，20×）各2-3張以及培養(yang) 瓶外觀照片一張留存，作為(wei) 售後時收到時細胞狀態的依據。

3）半貼細胞和貼壁不牢（懸浮）細胞：T25瓶置於(yu) 37℃培養(yang) 箱中約2-3h，顯微鏡下觀察細胞的情況，若細胞密度在60%以下，客戶需收集T25瓶中的懸浮細胞離心後用完quan培養(yang) 基重懸後打回到原培養(yang) 瓶中繼續培養(yang) ，若細胞生長70%-90%對細胞進行傳(chuan) 代，傳(chuan) 代時需要收集培養(yang) 基中懸浮的細胞離心後回收。

4）備注：運輸用的培養(yang) 基（灌液培養(yang) 基）不能再用來培養(yang) 細胞，請換用按照說明書(shu) 細胞培養(yang) 條件新配製的完quan培養(yang) 基來培養(yang) 細胞。  收到細胞後第一次傳(chuan) 代建議T25培養(yang) 瓶1：2傳(chuan) 代 。       

Bv2小鼠小膠質細胞/STR鑒定

一．培養(yang) 基及培養(yang) 凍存條件準備：

1）準備DMEM 基礎培養(yang) 基 (推薦：iCell-0001)         87%

      優(you) 質胎牛血清                                                           10%

      GlutaMAX-1穀an酰胺    (推薦：iCell-0900 )         1%

      HEPES 1M Buffer solution  (推薦：iCell-01200)    1%

      P/S青mei素-鏈mei素                                                     1%.

2）培養(yang) 條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配。

二． 細胞處理：

1）凍存細胞的複蘇：

將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入到含4-6mL完quan培養(yang) 基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，完quan培養(yang) 基重懸細胞。然後將細胞懸液加入含6-8ml完quan培養(yang) 基的培養(yang) 瓶（或皿）中37℃培養(yang) 過夜。第二天顯微鏡下觀察細胞生長情況和細胞密度。

2） 細胞傳(chuan) 代：如果細胞密度達70%-90%，即可進行傳(chuan) 代培養(yang) 。

該細胞為(wei) 懸浮和輕微的貼壁細胞，傳(chuan) 代可以參考以下方法：

1. 收集：將培養(yang) 瓶中的懸浮的細胞收集到離心管中。用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。由於(yu) 細胞貼壁不牢PBS潤洗後細胞會(hui) 脫落所以PBS也要回收到離心管中。

2. 加入0.25％（w / v）yi蛋白酶-0.53 mM EDTA於(yu) 培養(yang) 瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL）置於(yu) 37℃培養(yang) 箱中消化1-2分鍾（難消化的細胞可以適當延長消化時間），然後在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓並脫落迅速拿回操作台，輕敲幾下培養(yang) 瓶後加入3-4ml含10%FBS的培養(yang) 基來終止消化。

3. 將收集到的懸浮細胞、pbs清洗液中的細胞和消化下來的貼壁細胞以1000rpml離心5min，棄去上清，補加1-2mL培養(yang) 液後重懸混勻後將細胞懸液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照說明書(shu) 要求配置的新的完quan培養(yang) 基以保持細胞的生長活力，後續傳(chuan) 代根據實際情況按1:2~1:5的比例進行。

3） 細胞凍存: 收到細胞後建議在培養(yang) 前3代時凍存一批細胞種子以備後續實驗使用。

下麵T25瓶為(wei) 例；

1. 細胞凍存時按照細胞傳(chuan) 代的過程收集消化好的細胞到離心管中，可使用血球計數板計數，來決(jue) 定細胞的凍存密度。一般細胞的推薦凍存密度為(wei) 1×10^6~1×107個(ge) 活細胞/ml.

2. 1000rpm離心3-5min，去掉上清。用配製好的細胞凍存液重懸細胞 ，按每1ml凍存液含1×10^6~1×107個(ge) 活細胞/ml分配到一個(ge) 凍存管中將細胞分配到凍存管中，標注好名稱、代數、日期等信息。

3. 將要凍存的細胞置於(yu) 程序降溫盒中，-80度冰箱中過夜，之後轉入液氮容器中儲(chu) 存。同時記錄好凍存管在液氮容器中的位置以便後續查閱和使用。

　　18新利苹果客户端密码主要產(chan) 品和服務介紹：

　　1、原代細胞服務：

　　（1）各類模式哺乳動物的多種原代細胞資源

　　（2）多種人源性正常及腫瘤原代細胞資源

　　（3）原代細胞分離和培養(yang) 相關(guan) 試劑、kit、培養(yang) 基添加劑等

　　（4）原代細胞相關(guan) 技術服務及整體(ti) 實驗外包服務

　　2、細胞係服務：

　　（1）細胞株/係培養(yang) 、增殖、凍存和相關(guan) 說明書(shu)

　　（2）細胞係培養(yang) 過程的技術指導

　　（3）細胞係培養(yang) 基、添加劑、血清及相關(guan) 生長因子、試劑等

　　3、iPS細胞服務：

　　（1）iPS細胞基礎培養(yang) （有滋養(yang) 層or無滋養(yang) 層）

　　（2）iPS細胞增殖及冷凍保存

　　（4）iPS基礎培養(yang) 技術實習(xi)

　　（5）新藥及實驗儀(yi) 器上市前評估

　　4、其他技術外包服務、客戶定製服務等

沒有相關產品信息...