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18新利苹果客户端下载產(chan) 品介紹
HK-2 人腎皮質近曲小管上皮細胞/STR鑒定/鏡像綺點（iCell）介紹
1） 來源：腎皮質/近端小管
2） 形態：上皮細胞樣，貼壁生長
3） 含量：>1x106 個(ge) /mL
4） 汙染：支原體(ti) 、細菌、酵母和真菌檢測為(wei) 陰性
5） 規格：T25瓶或者1mL凍存管包裝
運輸和保存
可選擇幹冰運輸及發送複蘇存活細胞方式：
（1）幹冰運輸，收到後立即轉入液氮或者-80度冰箱凍存或直接複蘇；
（2）存活細胞，收到後應繼續生長，傳(chuan) 代達到細胞生長狀態良好時，再進行凍存。具體(ti) 操作見細胞培養(yang) 步驟。
（3）收到細胞後請拍照，3天內(nei) 如果發現汙染，請及時拍照與(yu) 我們(men) 聯係。
細胞用途：僅(jin) 供科研使用。
細胞接受後的處理：
1） 收到細胞後，請檢查是否漏液，如果漏液，請拍照片發給我們(men) 。
2） 請先在顯微鏡下確認細胞生長狀態，去掉封口膜並將T25瓶置於(yu) 37℃培養(yang) 約2-3h。
3） 棄去T25瓶中的培養(yang) 基，添加6ml新的*培養(yang) 基。
4） 如果細胞長滿（90%以上）請及時進行細胞傳(chuan) 代。
5） 接到細胞次日，請檢查細胞是否汙染，若發現汙染或疑似汙染，請及時與(yu) 我們(men) 取得聯係。
細胞培養(yang) 步驟
一．培養(yang) 基及培養(yang) 凍存條件準備：
1）準備培養(yang) 液Keratinocyte-SFM(Invitrogen,17005-042)
備注1：K-SFM(Invitrogen,17005-042)培養(yang) 液包含兩(liang) 個(ge) 組份：基礎培養(yang) 基1瓶（貨號10724-011）+生長因子2管貨號（37000-015）
備注2：按照K-SFM培養(yang) 基說明書(shu) ，需額外添加Gentamicin Solution。建議使用Gentamicin/Amphotericin Solution 500×（Gibco,R-015-10）。
2）培養(yang) 條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yang) 箱濕度為(wei) 70%-80%。
3）凍存液：*培養(yang) 液92.5%，7.5%DMSO，現用現配。
4）傳(chuan) 代比例：1:2或1:3
備注：如果沒有特別說明，收到細胞後的*次傳(chuan) 代一般是1:2。
傳(chuan) 代周期：4-6天
換液頻率：每周 2-3次
預期存活率 70%
二． 細胞處理：
1） 複蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yang) 基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鍾，棄去上清液，補加1-2mL培養(yang) 基後吹勻。然後將所有細胞懸液加入培養(yang) 瓶中培養(yang) 過夜（或將細胞懸液加入250px皿中，加入約8ml培養(yang) 基，培養(yang) 過夜）。第二天換液並檢查細胞密度。
2） 細胞傳(chuan) 代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳(chuan) 代培養(yang) 。
對於(yu) 貼壁細胞，傳(chuan) 代可參考以下方法：
1. 棄去培養(yang) 上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於(yu) 培養(yang) 瓶中，置於(yu) 37℃培養(yang) 箱中消化1-2分鍾，然後在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓並脫落，迅速拿回操作台，輕敲幾下培養(yang) 瓶後加少量培養(yang) 基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養(yang) 基，輕輕打勻後吸出，在1000RPM條件下離心4分鍾，棄去上清液，補加1-2mL培養(yang) 液後吹勻。
4. 收到細胞後*傳(chuan) 代推薦將細胞懸液按1：2的比例分到新的含6ml培養(yang) 基的新皿中或者瓶中，建議凍存一支備用，後續傳(chuan) 代根據實際情況按1:2到1:5的比例進行。
HK-2 人腎皮質近曲小管上皮細胞/STR鑒定/鏡像綺點（iCell）凍存：待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。
下麵T25瓶為(wei) 例；
1．細胞凍存時，棄去培養(yang) 基後，PBS清洗瓶底1-2次後加入1mlyi酶，細胞變圓脫落後，加入2ml*培養(yang) 基終止消化，可使用血球計數板計數。
2．1000RPM離心5分鍾去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至終濃度為(wei) 10%。加入DMSO後迅速混勻，按每1ml的數量分配到凍存管中，注意凍存管做好標識。本公司按每個(ge) 凍存管細胞數目大於(yu) 1X106個(ge) 細胞凍存。
3．將凍存管置於(yu) 程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個(ge) 小時以後轉入液氮灌儲(chu) 存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
18新利苹果客户端密码主要產(chan) 品和技術服務：
一、原代細胞服務
各類模式哺乳動物的多種原代細胞資源；
多種人源性正常及腫瘤原代細胞資源；
原代細胞分離和培養(yang) 相關(guan) 試劑、kit、培養(yang) 基添加劑等；
原代細胞相關(guan) 技術服務和整體(ti) 實驗外包服務；
二、細胞株/係服務
細胞株/係培養(yang) 、增殖、凍存和相關(guan) 說明書(shu) ；
細胞係培養(yang) 過程的技術指導；
細胞係培養(yang) 基、添加劑、血清及相關(guan) 生長因子、試劑等；
三、iPS細胞
iPS細胞基礎培養(yang) （有滋養(yang) 層or無滋養(yang) 層在）；
iPS細胞增殖及冷凍保存；
iPS基礎培養(yang) 技術實習(xi) ；
新藥及實驗儀(yi) 器上市前評估；
四、技術外包服務：各類細胞生物學實驗、分子生物學實驗、顯微鏡拍照服務等
五、其他：根據客戶需要定製服務等
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