小鼠肺微血管內(nei) 皮細胞構成半選擇性屏障，該屏障對於(yu) 肺氣體(ti) 交換，調節液體(ti) 和可溶物在血液與(yu) 肺間質之間的流動具有重要意義(yi) 。它還具有代謝功能，可以執行一定的非呼吸功能。在肺損傷(shang) 中，肺微血管內(nei) 皮細胞是活性氧類的重要靶細胞之一。

在肺炎的發生過程中，神經體(ti) 液介質和氧化劑作用於(yu) 內(nei) 皮細胞，使得細胞間隙滲透性增加，蛋白質由血液進入間質。細胞間隙滲透性的增加導致低氧血症，出現成人呼吸窘迫綜合征和非心源性肺水腫。

小鼠肺微血管內(nei) 皮細胞來源於(yu) 實驗動物的正常肺組織，細胞為(wei) 上皮樣，多角形細胞，貼壁培養(yang) ，采用CD31免疫熒光染色鑒定為(wei) 陽性，細胞純度高於(yu) 90%，不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體(ti) 、細菌、酵母和真菌。

1.試驗所需儀(yi) 器設備及試劑

（1）儀(yi) 器

（2）試劑耗材

2、小鼠肺微血管內(nei) 皮細胞的分離培養(yang)

1) 將5-10d的乳鼠浸泡入75%乙醇中，移入生物安全櫃，

2) 從(cong) 胸部解剖乳鼠，取出雙肺置於(yu) 預冷的PBS中，盡可能的除去結締組織等，

3) 取肺邊緣部分，剪碎，將組織塊移入T25培養(yang) 瓶中，倒置於(yu) 細胞培養(yang) 箱中，

4) 2h後，培養(yang) 瓶中注入2 mL內(nei) 皮培養(yang) 基，小心將培養(yang) 瓶正置於(yu) 培養(yang) 箱，確保組織塊不會(hui) 飄起來，

5) 每3d換液2mL，待細胞從(cong) 組織塊中爬出來後，隔2d換液，待細胞融合達到60-70%左右時，去除組織塊，將肺微血管內(nei) 皮細胞重新鋪瓶。